ELISA試劑盒用於測定血清◕☁·•、血漿及相關液體樣本中待測物質的含量₪✘◕↟·。

 

　　它的實驗原理•·：

　　ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平₪✘◕↟·。用純化的待測物質抗體包被微孔板▩☁╃，製成固相抗體▩☁╃，往包被單抗的微孔中依次加入待測物質▩☁╃，再與HRP標記的待測物質抗體結合▩☁╃，形成抗體-抗原-酶標抗體複合物▩☁╃，經過洗滌後加底物TMB顯色₪✘◕↟·。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色▩☁╃，並在酸的作用下轉化成最終的黃色₪✘◕↟·。顏色的深淺和樣品中的待測物質呈正相關₪✘◕↟·。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）▩☁╃，透過標準曲線計算樣品中待測物質濃度₪✘◕↟·。

 

　　ELISA試劑盒的計算•·：

　　以標準物的濃度為橫座標▩☁╃，OD值為縱座標▩☁╃，在座標紙上繪出標準曲線▩☁╃，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線迴歸方程式▩☁╃，將樣品的OD值代入方程式▩☁╃，計算出樣品濃度▩☁╃，再乘以稀釋倍數▩☁╃，即為樣品的實際濃度₪✘◕↟·。

 

　　它的注意事項•·：

　　1◕☁·•、ELISA試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘後方可使用▩☁╃，酶標包被板開封后如未用完▩☁╃，板條應裝入密封袋中儲存₪✘◕↟·。

　　2◕☁·•、濃洗滌液可能會有結晶析出▩☁╃，稀釋時可在水浴中加溫助溶▩☁╃，洗滌時不影響結果₪✘◕↟·。

　　3◕☁·•、各步加樣均應使用加樣器▩☁╃，並經常校對其準確性▩☁╃，以避免試驗誤差₪✘◕↟·。一次加樣時間最好控制在5分鐘內▩☁╃，如標本數量多▩☁╃，推薦使用排槍加樣₪✘◕↟·。

　　4◕☁·•、請每次測定的同時做標準曲線▩☁╃，最好做復孔₪✘◕↟·。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大於標準品孔第一孔的OD值）▩☁╃，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）後再測定▩☁╃，計算時請最後乘以總稀釋倍數（×n×5）₪✘◕↟·。

　　5◕☁·•、封板膜只限一次性使用▩☁╃，以避免交叉汙染₪✘◕↟·。

　　6◕☁·•、底物請避光儲存₪✘◕↟·。

　　7◕☁·•、嚴格按照說明書的操作進行▩☁╃，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準₪✘◕↟·。

　　8◕☁·•、所有樣品▩☁╃，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理₪✘◕↟·。

　　9◕☁·•、本試劑不同批號組分不得混用₪✘◕↟·。

　　10◕☁·•、如與英文說明書有異▩☁╃，以英文說明書為準₪✘◕↟·。