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詳細解析╃·!細胞爬片的實驗步驟及注意事項
  • 釋出日期·✘•◕✘:2023-01-26      瀏覽次數·✘•◕✘:108
    •   細胞爬片就是讓細胞(貼壁細胞)在片子(蓋玻片)上生長▩₪│☁✘。主要用來做免疫細胞化學啊╃₪✘│₪,原位雜交等吧▩₪│☁✘。在做這些實驗時╃₪✘│₪,製作標本有兩種╃₪✘│₪,一是離心做細胞塗片╃₪✘│₪,二是細胞爬片▩₪│☁✘。利用貼壁細胞在玻璃等物質上貼壁生長的特點╃₪✘│₪,讓它在蓋玻片上生長╃₪✘│₪,可以使製作的細胞片子更牢固╃₪✘│₪,在後面的洗滌過程中╃₪✘│₪,不易脫落▩₪│☁✘。特別是在用粘附劑如多聚賴安酸處理過的片子上╃₪✘│₪,細胞貼得更牢固▩₪│☁✘。
       
        細胞爬片的實驗步驟·✘•◕✘:
        1╃✘、將蓋玻片用洗潔劑清洗乾淨╃₪✘│₪,然後用自來水將洗潔劑沖洗乾淨╃₪✘│₪,再用純水沖洗三遍╃₪✘│₪,75%的酒精中靜置浸泡10min▩₪│☁✘。
        2╃✘、用鑷子夾起蓋玻片在酒精燈上將酒精燒乾╃₪✘│₪,溫度不可太高▩₪│☁✘。
        3╃✘、將燒乾的蓋玻片放在六孔板中╃₪✘│₪,待冷卻後在6孔板中先加入2ml培養基╃₪✘│₪,後加入細胞懸液╃₪✘│₪,輕輕上下左右晃動╃₪✘│₪,後置於37℃ 5% CO2培養箱中培養▩₪│☁✘。
       
        實驗注意事項·✘•◕✘:
        使用細胞爬片時╃₪✘│₪,比如在六孔板中放入爬片╃₪✘│₪,六孔板的孔底面積往往會比爬片面積多出一部分╃₪✘│₪,加細胞懸液時常常就是細胞鋪滿整個孔底╃₪✘│₪,有時細胞生長邊集現象╃₪✘│₪,就是靠近壁邊緣密度要高些╃₪✘│₪,這樣處於中央玻片上爬的細胞數量就可能相對較少▩₪│☁✘。
        比較好的做法是將玻片放入孔板的孔內後╃₪✘│₪,加細胞懸液時只滴到玻片上╃₪✘│₪,一直滴到液體佈滿整個玻片又不會溢位玻片邊緣(因為液體表面張力作用可以很容易做到這一點▩₪│☁✘。)╃₪✘│₪,放在培養箱裡╃₪✘│₪,等細胞貼壁後╃₪✘│₪,取出╃₪✘│₪,再滴加培養基佈滿整個孔底╃₪✘│₪,繼續培養╃₪✘│₪,這樣玻片上的細胞生長的密度就會很集中▩₪│☁✘。
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